利用工程設計的脫落酸受體控制植物用水

2021-09-02 02:34:14 字數 2529 閱讀 2684

時至今日,全球氣溫變暖和淡水資源的貧乏嚴重制約了農業生產。因此開發出節水型作物,進而提高農業用水利用率,具有非常重要的現實作用。aba是一種植物激素,在水缺乏時,其受體感受到aba訊號通過控制葉片氣孔的閉合,減少植物的蒸騰作用流失的水分,可以提高作物的耐逆性。作者認為可以通過改造aba的受體,使其感受到農用化學品如雙炔醯菌胺(廣泛用於防治大多數卵菌綱病害)時,啟動aba訊號途徑,可以有效提高水的利用效率。

期刊:nature

if: 41.577

研究方向:調節擬南芥細胞擴增的分子機制和aba訊號轉導途徑

doi:10.1038/nature14123

在缺水時,植物激素aba可以通過控制葉片氣孔的開度來減少水分的蒸發,提高水的利用效率。因此改造aba受體pyr1使其感受農用雙炔醯菌胺啟用aba訊號途徑可以提高植物的耐旱性。pyr1是aba的一種受體,作者通過飽和突變的方法獲得乙個六突突變體pyr1mandi可以響應納摩爾級別的雙炔醯菌胺,耐旱性顯著提高。這種策略同樣可以應用於其他植物受體,並為作物改良提供新的途徑。

植物aba受體首先感知aba並與磷酸酶pp2c互作,進而解除pp2c對下游的snrk2激酶的抑制作用。snrk2啟用下游的與aba訊號相關的轉錄因子的表達,其中包括直接調控氣孔開閉的基因sac1。因此改造aba受體使其感知農用化學品並啟動aba訊號途徑可以優化水資源的利用。

1. pyr1(aba受體)突變體的創制

pyr1是aba訊號其中乙個受體,作者通過飽和突變pyr1的方式獲得了7125種突變體,用雙炔醯菌胺(mandipropamid)對這些突變體進行篩選,發現乙個六突突變體pyr1mandi可以響應納摩爾級別的mandipropamid,進而啟用aba途徑關閉氣孔,減少水分的蒸發。

圖1. pyr1mandi可以響應納摩爾級的mandipropamid

2. pyr1mandi蛋白空間構象發生變化

為了進一步**改造後的aba受體響應雙炔醯菌胺(mandipropamid)的分子機理,作者對pyr1的乙個四突pyr1(k59r/v81i/f108a/f159l)(四突比六突晶體構象更清晰)蛋白空間構象進行分析,發現相比野生型pyr1,其中乙個顯著的變化就是在四突突變體中,識別結合位置空間明顯增加。

圖2. pyr1的乙個四突突變體晶體構象與野生型的比較

3. 利用rna-seq比較野生型與35s::pyr1mandi轉基因植株響應aba和mandipropamid之間轉錄組之間差異

首先作者用aba、mandipropamid分別處理野生型和35s::pyr1mandi轉基因植株,mandipropamid 處理野生型不會引起顯著的aba誘導的反應(圖3a),而mandipropamid 處理35s::pyr1mandi轉基因植株則會引起類似的aba處理野生型的反應(圖3b)。此外,作者用aba分別處理野生型和35s::pyr1mandi轉基因植株,兩者之間的反應高度類似(圖3c),這表明轉入pyr1mandi並不會影響aba其他的受體對外源aba的響應。為了排除轉基因的過程是否會對植株轉錄產生影響,作者同時比較了野生型和35s::pyr1mandi轉基因植株之間的轉錄,發現兩者幾乎沒有差異(圖3d),這說明轉基因過程對植株轉錄沒有影響。

圖3. mandipropamid在pyr1mandi基因型中選擇性地誘導aba類似的轉錄反應

4. mandipropamid處理35s::pyr1mandi轉基因植株可以顯著提高其耐旱性

農業化學控制pyr1mandi基因型的蒸騰和耐旱性

圖4. mandipropamid控制pyr1mandi基因型的蒸騰和耐旱性

植物激素aba乙個重要的功能就是可以誘導植物在水缺乏時關閉氣孔,減少水分的蒸發,這個過程也會伴隨著植物表面溫度的公升高。作者通過檢測葉片表面溫度變化來反映氣孔的開閉。與對照相比,mandipropamid處理35s::pyr1mandi轉基因植株葉片表面溫度顯著公升高,表明其氣孔已經關閉(圖4a,b)。接著作者分別用野生型與35s::pyr1mandi轉基因植株進行乾旱處理,35s::pyr1mandi轉基因植株耐旱性明顯提高。

植物的生長發育與耐逆性的提高就像天平的兩端,提高植物的耐逆性必然是以犧牲生長發育作為代價才能實現。作者在本篇文章中給我們介紹一種全新的既可以提高植物耐旱性,又不影響其生長發育的思路。通過改造植物激素aba受體pyr1,使其響應mandipropamid提高其耐旱性,又可以顯著降低生產應用的成本,可謂一舉兩得。

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