轉錄組資料飽和度評估方法

2021-06-27 08:43:22 字數 676 閱讀 6439



**:下面回到reads的飽和度分析方面。我以自己乙個實際研究的課題來簡單介紹一下我的方法。我做的是細菌的轉錄組。測序完之後,資料處理的基本流程

1)對低質量的reads進行過濾

我的研究中採用的是非鏈特異性測序,single-end的reads,reads讀長81bp。一般測序的reads中,每條read後面的一些鹼基可能會測得比較差(從測序的reads質量報告圖上可以觀察得到)。所以做轉錄組研究中可以把後面那些質量差的截掉。

設定的過濾條件:

read前20bp無n(這一條可以考慮不要)

整條read中質量值低於20的鹼基不超過20%

整條read中質量值低於13的鹼基不超過10%

整條read的鹼基平均值不小於20

對於不滿足條件的reads,採取的辦法就是不斷去掉最後乙個鹼基;去掉之後分析剩下前n-1bp的鹼基分析,利用上面的條件進行篩選,如還是不滿足繼續截斷,然後對剩下n-2bp分析,由此下去,當最後長度小於50bp的時候,如果還不滿足條件的話,直接把該條reads丟掉,然後分析下一條reads。

3)飽和度評估

轉錄組資料飽和度評估方法

補充一:

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