螢光定量PCR 基因相對表達量計算方法

2021-10-24 23:18:17 字數 400 閱讀 3594

螢光定量pcr之後計算目的基因的相對表達量一般採用2-△△ct的方法。我們還是假設對照組和處理組各有三個生物學重複(即對照組3個cdna樣品cdna1, cdna2, cdna3,處理組3個cdna樣品cdna4, cdna5, cdna6),三個技術重複(即每個cdna的每個基因點三個孔)。

1. 跑完程式後,先看一下溶解曲線。如果熔解曲線的峰比較單一,而且同乙個基因的峰基本重合,說明沒問題;如果峰比較雜亂,多峰,甚至壓根沒峰,證明結果不行,要麼引物有問題,要麼加樣有問題,或者程式搞錯了,總之自己要回想一下**出了問題。

2. 將原始ct值按照如下格式輸入excel中。

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